-
Ilmmeðferð Hrein náttúruleg ilmkjarnaolía úr eukalyptuslaufum fyrir húð og líkama
Útdráttar- eða vinnsluaðferð: gufueiming
Eimingarútdráttur hluti: lauf
Uppruni lands: Kína
Notkun: Dreifð/ilmmeðferð/nudd
Geymsluþol: 3 ár
Sérsniðin þjónusta: sérsniðin merki og kassi eða eins og þú þarft
Vottun: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
Eukalyptusolía hvarfast við slím og losar það til að veita tafarlausa léttir frá mæði og öðrum öndunarerfiðleikum. Hún er nógu öflug til að virka sem skordýrafælandi. Þegar hún er notuð í ilmmeðferð veitir hún skýrleika í hugsun. Lækningaleg ávinningur hennar er vegna örverueyðandi, bakteríudrepandi, sótthreinsandi, krampastillandi og veirueyðandi eiginleika. Notið eukalyptusolíu gegn ýmsum húð- og heilsufarsvandamálum. Hún inniheldur eukalyptól sem er einnig þekkt sem cineól. Þetta efnasamband mun styðja við almenna heilsu þína og vellíðan.
-
Náttúruleg hrein lífræn lavender ilmkjarnaolía fyrir húðumhirðu með ilmmeðferð
Útdráttar- eða vinnsluaðferð: Gufueiming
Eimingarútdráttarhluti: Blóm
Uppruni lands: Kína
Notkun: Dreifð/ilmmeðferð/nudd
Geymsluþol: 3 ár
Sérsniðin þjónusta: sérsniðin merki og kassi eða eins og þú þarft
Vottun: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100% hrein náttúruleg lífræn Magnoliae Officmalis Cortex olía ilmkjarnaolía fyrir húðumhirðu
Ilmurinn af Hou Po er strax beisk og skarpur og opnast síðan smám saman með djúpri, sírópskenndri sætu og hlýju.
Hou Po hefur tengsl við jarðar- og málmþættina þar sem beisk hiti þess hefur sterk áhrif á niðurbrot Qi og þurran raka. Vegna þessara eiginleika er það notað í kínverskri læknisfræði til að lina stöðnun og uppsöfnun í meltingarveginum, sem og hósta og öndunarerfiðleika vegna slíms sem stíflar lungun.
Magnolia Officinials er lauftré sem á uppruna sinn í fjöllum og dölum Sichuan, Hubei og annarra kínverskra héraða. Mjög ilmandi börkurinn, sem notaður er í hefðbundinni kínverskri læknisfræði, er fjarlægður af stilkum, greinum og rótum og safnað frá apríl til júní. Þykkur, sléttur börkurinn, þungur af olíu, hefur fjólubláan lit að innan með kristalkenndum gljáa.
Iðkendur gætu íhugað að blanda Hou Po saman við Qing Pi ilmkjarnaolíu sem viðbót við toppnótur í blöndum sem miða að því að brjóta upp uppsöfnun.
-
OEM sérsniðin pakki Náttúruleg Macrocephalae Rhizoma olía
Sem áhrifarík krabbameinslyf er 5-flúoróúrasíl (5-FU) mikið notað til meðferðar á illkynja æxlum í meltingarvegi, höfði, hálsi, brjósti og eggjastokkum. 5-FU er fyrsta meðferðarúrræði við krabbameini í ristli og endaþarmi í klínískum rannsóknum. Verkunarháttur 5-FU er að hindra umbreytingu úrasíl kjarnsýru í týmín kjarnsýru í æxlisfrumum og hafa síðan áhrif á myndun og viðgerðir á DNA og RNA til að ná frumudrepandi áhrifum (Afzal o.fl., 2009; Ducreux o.fl., 2015; Longley o.fl., 2003). Hins vegar veldur 5-FU einnig niðurgangi af völdum krabbameinslyfjameðferðar, sem er ein algengasta aukaverkunin sem hrjáir marga sjúklinga (Filho o.fl., 2016). Tíðni niðurgangs hjá sjúklingum sem fengu 5-FU var allt að 50%–80%, sem hafði alvarleg áhrif á framgang og virkni krabbameinslyfjameðferðar (Iacovelli o.fl., 2014; Rosenoff o.fl., 2006). Þar af leiðandi er afar mikilvægt að finna árangursríka meðferð við 5-FU-völdum CID.
Eins og er hafa bæði lyfjalausar og lyfjalausar íhlutunaraðferðir verið innleiddar í klíníska meðferð við CID. Lyfjalausar íhlutunaraðferðir fela í sér sanngjarnt mataræði og fæðubótarefni með salti, sykri og öðrum næringarefnum. Lyf eins og lóperamíð og oktreótíð eru almennt notuð í meðferð við niðurgangi við CID (Benson o.fl., 2004). Að auki eru þjóðlækningar einnig notaðar til að meðhöndla CID með sinni einstöku meðferð í ýmsum löndum. Hefðbundin kínversk læknisfræði (TCM) er dæmigerð þjóðlækning sem hefur verið stunduð í meira en 2000 ár í Austur-Asíulöndum, þar á meðal Kína, Japan og Kóreu (Qi o.fl., 2010). Kínversk læknisfræði heldur því fram að krabbameinslyf valdi Qi-neyslu, miltaskorti, magaójafnvægi og raka í innfrumum, sem leiðir til leiðnivandamála í þörmum. Í kenningum kínverskrar læknisfræði ætti meðferðarstefna við CID aðallega að byggjast á því að bæta við Qi og styrkja milta (Wang o.fl., 1994).
Þurrkaðar ræturAtractylodes macrocephalusKoidz. (AM) ogPanax ginsengCA Mey (PG) eru dæmigerð náttúrulyf í hefðbundinni kínverskri hefðbundinni læknisfræði með sömu áhrifum, þ.e. að bæta við Qi og styrkja milta (Li o.fl., 2014). AM og PG eru venjulega notuð sem jurtapar (einfaldasta form samhæfingar kínverskra náttúrulyfja) með áhrifum sem bæta við Qi og styrkja milta til að meðhöndla niðurgang. Til dæmis hafa AM og PG verið skráð í klassískum niðurgangslyfjaformúlum eins og Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang frá ...Taiping Huimin Heji Ju Fang(Song Dynasty, Kína) og Bu Zhong Yi Qi Tang fráPi Wei Lun(Yuan-veldið, Kína) (Mynd 1). Nokkrar fyrri rannsóknir hafa sýnt að allar þrjár formúlurnar hafa getu til að draga úr kláða í meltingarvegi (Bai o.fl., 2017; Chen o.fl., 2019; Gou o.fl., 2016). Þar að auki sýndi fyrri rannsókn okkar að Shenzhu hylki, sem innihalda eingöngu amínósýrur (AM) og PG, hafa hugsanleg áhrif á meðferð við niðurgangi, ristilbólgu (xiexie heilkenni) og öðrum meltingarfærasjúkdómum (Feng o.fl., 2018). Hins vegar hefur engin rannsókn fjallað um áhrif og verkunarháttur AM og PG við meðferð á CID, hvort sem er í samsetningu eða einu sér.
Nú er talið að þarmaflóran sé hugsanlegur þáttur í skilningi á meðferðarferli hefðbundinnar kínverskrar lækninga (Feng o.fl., 2019). Nútímarannsóknir benda til þess að þarmaflóran gegni lykilhlutverki í að viðhalda jafnvægi í þörmum. Heilbrigð þarmaflóra stuðlar að verndun þarmaslímhúðar, efnaskiptum, jafnvægi og svörun ónæmiskerfisins og bælingu sýkla (Thursby og Juge, 2017; Pickard o.fl., 2017). Óeðlileg þarmaflóra skerðir lífeðlisfræðilega og ónæmisstarfsemi mannslíkamans beint eða óbeint og veldur aukaverkunum eins og niðurgangi (Patel o.fl., 2016; Zhao og Shen, 2010). Rannsóknir hafa sýnt að 5-FU breytti verulega uppbyggingu þarmaflórunnar í músum með niðurgang (Li o.fl., 2017). Því gætu áhrif morguns og kvölds á 5-FU-völdum niðurgangi verið miðluð af þarmaflórunni. Hins vegar er enn óþekkt hvort AM og PG eitt sér eða í samsetningu geti komið í veg fyrir 5-FU-völdum niðurgangi með því að hafa áhrif á þarmaflóruna.
Til að rannsaka áhrif gegn niðurgangi og undirliggjandi verkunarháttur AM og PG, notuðum við 5-FU til að herma eftir niðurgangslíkani í músum. Hér einbeittum við okkur að hugsanlegum áhrifum stakrar og samsettrar gjafar (AP) afAtractylodes macrocephalusilmkjarnaolía (AMO) ogPanax ginsengHeildarsaponín (PGS), virku efnin sem eru unnin úr AM og PG, á niðurgang, þarmasjúkdómafræði og örveruuppbyggingu eftir krabbameinslyfjameðferð með 5-FU.
-
100% hrein náttúruleg Eucommiae Foliuml ilmkjarnaolía fyrir húðumhirðu
Eucommia ulmoides(EU) (almennt kallað „Du Zhong“ á kínversku) tilheyra ættinni Eucommiaceae, ættkvísl lítilla trjáa sem eru upprunnin í Mið-Kína [1Þessi planta er víða ræktuð í Kína vegna læknisfræðilegs mikilvægis hennar. Um 112 efnasambönd hafa verið einangruð úr blöðruhálskirtli, þar á meðal lignan, iridoid, fenól, sterar og önnur efnasambönd. Viðbótarjurtir þessarar plöntu (eins og ljúffengt te) hafa sýnt fram á lækningamátt. Laufblöð blöðruhálskirtla hafa meiri virkni sem tengist berki, blómum og ávöxtum [2,3]. Greint hefur verið frá því að lauf EU-jurtarinnar auki styrk beina og styrki vöðva líkamans [4], sem leiðir til langlífis og eflir frjósemi hjá mönnum [5]. Ljúffengt te úr laufum evrópu hefur reynst draga úr fitumyndun og auka orkuefnaskipti. Greint hefur verið frá því að flavonoid efnasambönd (eins og rutin, klórógen sýra, ferúlsýra og koffínsýra) sýni andoxunarvirkni í laufum evrópu [6].
Þó að nægar heimildir séu til um plöntuefnafræðilega eiginleika EU, þá eru fáar rannsóknir til á lyfjafræðilegum eiginleikum hinna ýmsu efnasambanda sem unnin eru úr berki, fræjum, stilkum og laufum EU. Þessi yfirlitsgrein mun varpa ljósi á ítarlegar upplýsingar um mismunandi efnasambönd sem unnin eru úr hinum ýmsu hlutum (berki, fræjum, stilk og laufum) EU og hugsanlega notkun þessara efnasambanda í heilsufarslegum eiginleikum með vísindalegum sönnunargögnum og þannig veita viðmiðunarefni fyrir beitingu EU.
-
Hrein náttúruleg Houttuynia cordata olía Houttuynia Cordata olía Lchthammolum olía
Í flestum þróunarlöndum treysta 70-95% íbúanna á hefðbundnar læknisfræðimeðferðir í grunnheilbrigðisþjónustu og af þeim nota 85% plöntur eða útdrætti þeirra sem virka efnið.1Leit að nýjum líffræðilega virkum efnasamböndum úr plöntum er venjulega háð upplýsingum um þjóðerni og þjóðfélag sem aflað er frá læknum á staðnum og er enn talin mikilvæg uppspretta lyfjaþróunar. Á Indlandi eru um það bil 2000 lyf af jurtaríkinu.2] Í ljósi útbreidds áhuga á notkun lækningajurta er þessi yfirlitsgrein umHouttuynia cordataThunb. veitir uppfærðar upplýsingar með vísan til grasafræðilegra, viðskiptalegra, þjóðfræðilegra, lyfjafræðilegra, plöntuefnafræðilegra og lyfjafræðilegra rannsókna sem birtast í fræðiritum.H. cordataThunb. tilheyrir fjölskyldunniSaururaceaeog er almennt þekkt sem kínverskur eðluhali. Þetta er fjölær jurt með stoloniferous rhizome sem hefur tvær aðskildar efnafræðilegar gerðir.[3,4Kínverska efnafræðilega gerð tegundarinnar finnst í villtum og hálfvilltum aðstæðum á Norðaustur-Indlandi frá apríl til september.5,6,7]H. cordataer fáanlegt á Indlandi, sérstaklega í Brahmaputra-dalnum í Assam, og er notað af ýmsum ættbálkum í Assam sem grænmeti sem og í ýmsum lækningalegum tilgangi á hefðbundinn hátt.
-
Framleiðandi 100% hrein Arctium lappa olía – Náttúruleg lime Arctium lappa olía með gæðavottorðum
Heilsufarslegur ávinningur
Kjarnorta er oft borðað, en einnig er hægt að þurrka hana og láta hana liggja í bleyti í te. Hún virkar vel sem uppspretta inúlíns, sem er...prebiotictrefjar sem hjálpa meltingunni og bæta þarmaheilsu. Að auki inniheldur þessi rót flavonoida (næringarefni fyrir plöntur),plöntuefniog andoxunarefni sem vitað er að hafa heilsufarslegan ávinning.
Að auki getur burdockrót veitt aðra kosti eins og:
Draga úr langvinnri bólgu Kjarnortarót inniheldur fjölda andoxunarefna, svo sem kversetín, fenólsýrur og lúteólín, sem geta hjálpað til við að vernda frumur þínar gegn ...sindurefniÞessi andoxunarefni hjálpa til við að draga úr bólgum um allan líkamann.
Heilsufarsáhætta
Kjarnorta er talin örugg til neyslu eða drykkjar sem te. Þessi planta líkist þó mjög náttskuggaplöntum belladonna, sem eru eitraðar. Mælt er með því að kaupa aðeins kjarnorta frá traustum söluaðilum og forðast að tína hana sjálfur. Þar að auki eru takmarkaðar upplýsingar um áhrif hennar á börn eða barnshafandi konur. Ræddu við lækninn þinn áður en þú notar kjarnorta handa börnum eða ef þú ert barnshafandi.
Hér eru nokkrar aðrar mögulegar heilsufarsáhættu sem vert er að hafa í huga ef þú notar burdockrót:
Aukin ofþornun
Kjarnorta virkar eins og náttúrulegt þvagræsilyf, sem getur leitt til ofþornunar. Ef þú tekur vatnslosandi töflur eða önnur þvagræsilyf, ættir þú ekki að taka kjarnorta. Ef þú tekur þessi lyf er mikilvægt að vera meðvitaður um önnur lyf, jurtir og innihaldsefni sem geta leitt til ofþornunar.
Ofnæmisviðbrögð
Ef þú ert viðkvæmur eða hefur sögu um ofnæmisviðbrögð við margaréttum, ambrosíu eða krysantemum, þá ert þú í aukinni hættu á ofnæmisviðbrögðum við burdockrót.
-
Heildsöluverð á 100% hreinni AsariRadix Et Rhizoma olíu, slökun, ilmmeðferð, eucalyptus globulus
Rannsóknir á dýrum og in vitro hafa rannsakað hugsanleg sveppalyf, bólgueyðandi og hjarta- og æðasjúkdómsáhrif sassafras og innihaldsefna þess. Hins vegar skortir klínískar rannsóknir og sassafras er ekki talið öruggt til notkunar. Safról, aðal innihaldsefnið í rótarberki og olíu sassafras, hefur verið bannað af bandarísku matvæla- og lyfjaeftirlitinu (FDA), þar á meðal sem bragðefni eða ilmefni, og ætti ekki að nota það innvortis eða utanaðkomandi, þar sem það er hugsanlega krabbameinsvaldandi. Safról hefur verið notað í ólöglegri framleiðslu á 3,4-metýlen-díoxýmetamfetamíni (MDMA), einnig þekkt undir götunöfnunum „ecstasy“ eða „Molly“, og sala á safról og sassafrasolíu er undir eftirliti bandarísku lyfjaeftirlitsins.
-
Heildsöluverð á magni 100% hrein Stellariae Radix ilmkjarnaolía (ný) Slakandi ilmmeðferð Eucalyptus globulus
Kínverska lyfjaskráin (útgáfa 2020) krefst þess að metanólútdráttur úr YCH sé ekki minni en 20,0% [2], án þess að aðrir gæðamatsvísar hafi verið tilgreindir. Niðurstöður þessarar rannsóknar sýna að innihald metanólútdráttar úr villtum og ræktuðum sýnum uppfyllti bæði staðal lyfjaskrárinnar og enginn marktækur munur var á milli þeirra. Því var enginn augljós gæðamunur á villtum og ræktuðum sýnum, samkvæmt þeirri vísitölu. Hins vegar var innihald heildarsteróla og heildarflavonoíða í villtum sýnum marktækt hærra en í ræktuðum sýnum. Frekari efnaskiptagreining leiddi í ljós mikla fjölbreytni í efnaskiptum milli villtra og ræktaðra sýna. Að auki voru 97 marktækt ólík efnaskipti fjarlægð, sem eru talin upp íViðbótartafla S2Meðal þessara marktækt ólíku umbrotsefna eru β-sitósteról (ID er M397T42) og afleiður kversetíns (M447T204_2), sem hafa verið tilkynnt sem virk innihaldsefni. Áður ótilgreind innihaldsefni, svo sem trígónelín (M138T291_2), betaín (M118T277_2), fústín (M269T36), rótenón (M241T189), arktín (M557T165) og logansýra (M399T284_2), voru einnig meðal mismunandi umbrotsefna. Þessir þættir gegna ýmsum hlutverkum í oxunarvörn, bólgueyðandi, útrýmingu sindurefna, krabbameinsvörn og meðferð æðakölkunar og gætu því verið hugsanleg ný virk innihaldsefni í YCH. Innihald virkra innihaldsefna ræður virkni og gæðum lyfjaefnanna [7Í stuttu máli má segja að metanólútdráttur, sem eina gæðamatsvísitalan fyrir YCH, hefur nokkrar takmarkanir og þarf að skoða nánar sértækari gæðamerki. Marktækur munur var á heildarsterólum, heildarflavonoíðum og innihaldi margra annarra mismunandi umbrotsefna milli villtra og ræktaðra YCH; þannig að hugsanlega var einhver gæðamunur á milli þeirra. Á sama tíma gætu nýuppgötvuðu mögulegu virku innihaldsefnin í YCH haft mikilvægt viðmiðunargildi fyrir rannsóknir á virkni YCH og frekari þróun YCH auðlinda.
Mikilvægi ósvikinna lækningaefna hefur lengi verið viðurkennt í tilteknu upprunasvæði fyrir framleiðslu á kínverskum náttúrulyfjum af framúrskarandi gæðum [8Hágæði eru nauðsynlegur eiginleiki ósvikinna lækningaefna og búsvæði eru mikilvægur þáttur sem hefur áhrif á gæði slíkra efna. Allt frá því að YCH fór að vera notað sem lyf hefur það lengi verið ríkjandi af villtum YCH. Eftir að YCH var kynnt til sögunnar og tamt í Ningxia á níunda áratugnum færðist uppspretta lækningaefna Yinchaihu smám saman frá villtum yfir í ræktaða YCH. Samkvæmt fyrri rannsókn á uppruna YCH [9] og vettvangsrannsóknir rannsóknarhóps okkar hafa leitt í ljós að verulegur munur er á útbreiðslusvæðum ræktaðra og villtra lyfjaefna. Villta YCH er aðallega útbreitt í Ningxia Hui sjálfstjórnarhéraði í Shaanxia héraði, aðliggjandi þurrlendi Innri Mongólíu og mið-Ningxia. Einkum er eyðimerkursteppan á þessum svæðum hentugasta búsvæðið fyrir vöxt YCH. Aftur á móti er ræktað YCH aðallega útbreitt sunnan við villta útbreiðslusvæðið, svo sem í Tongxin sýslu (Ræktað I) og nærliggjandi svæðum, sem hefur orðið stærsta ræktunar- og framleiðslustöð Kína, og Pengyang sýslu (Ræktað II), sem er staðsett á sunnarlegu svæði og er annað framleiðslusvæði fyrir ræktaða YCH. Ennfremur eru búsvæði ofangreindra tveggja ræktaðra svæða ekki eyðimerkursteppur. Þess vegna, auk framleiðsluhátta, er einnig verulegur munur á búsvæðum villtra og ræktaðra YCH. Búsvæði er mikilvægur þáttur sem hefur áhrif á gæði náttúrulyfja. Mismunandi búsvæði munu hafa áhrif á myndun og uppsöfnun aukaefna í plöntunum og þar með áhrif á gæði lyfja [10,11Þess vegna gætu marktækir munurinn á innihaldi heildarflavonoida og heildarsteróla og tjáningu þeirra 53 umbrotsefna sem við fundum í þessari rannsókn verið afleiðing af umhverfisstjórnun og mismunandi búsvæðum.Ein helsta leiðin sem umhverfið hefur áhrif á gæði lyfjaefna er með því að beita álagi á upprunaplönturnar. Miðlungsmikið umhverfisálag hefur tilhneigingu til að örva uppsöfnun aukaefnaskipta [12,13Tilgátan um vaxtar-/aðgreiningarjafnvægi segir að þegar næringarefni eru nægilegt vaxi plöntur fyrst og fremst, en þegar næringarefni eru skortur aðgreinast plöntur fyrst og fremst og framleiða fleiri afleiddar umbrotsefni [14]. Þurrkar vegna vatnsskorts er helsta umhverfisálagið sem plöntur á þurrum svæðum standa frammi fyrir. Í þessari rannsókn er vatnsástand ræktaðra YCH-plantna ríkulegra, með árlegri úrkomu sem er marktækt hærri en hjá villtum YCH-plantnum (vatnsframboð fyrir ræktaða I-planta var um það bil tvöfalt hærra en hjá villtum; ræktaða II var um það bil 3,5 sinnum hærra en hjá villtum). Að auki er jarðvegurinn í villtu umhverfi sandur, en jarðvegurinn á ræktarlandi er leirjarðvegur. Í samanburði við leir hefur sandur jarðvegur lélega vatnsgeymslugetu og er líklegri til að auka þurrkaálag. Á sama tíma fylgdi ræktunarferlið oft vökvun, þannig að þurrkaálagið var lágt. Villtur YCH-planta vex í erfiðum náttúrulegum þurrum búsvæðum og því getur hann orðið fyrir alvarlegri þurrkaálagi.Osmósustjórnun er mikilvægur lífeðlisfræðilegur ferill sem plantur notar til að takast á við þurrkastreitu og alkalóíðar eru mikilvægir osmósustjórnendur í háplöntum [.15Betaín eru vatnsleysanleg alkalóíð fjórgreind ammóníumsambönd og geta virkað sem osmóverndandi efni. Þurrkastreita getur dregið úr osmósumátt frumna, en osmóverndandi efni varðveita og viðhalda uppbyggingu og heilleika líffræðilegra stórsameinda og draga á áhrifaríkan hátt úr tjóni af völdum þurrkastreitu á plöntum [16]. Til dæmis, við þurrkaástand, jókst betaíninnihald sykurrófa og Lycium barbarum verulega [17,18Trígónelín er stjórnandi frumuvaxtar og við þurrkaálag getur það lengt frumuhringrás plantna, hamlað frumuvexti og leitt til rýrnunar á frumurúmmáli. Hlutfallsleg aukning á styrk uppleystra efna í frumunni gerir plöntunni kleift að ná osmósustjórnun og auka getu sína til að standast þurrkaálag [19]. JIA X [20] kom í ljós að með aukinni þurrkaálagi framleiddi Astragalus membranaceus (uppspretta hefðbundinnar kínverskrar lækninga) meira af trígónelíni, sem virkar til að stjórna osmósugetu og bæta getu plantna til að standast þurrkaálag. Einnig hefur verið sýnt fram á að flavonoidar gegna mikilvægu hlutverki í viðnámi plantna gegn þurrkaálagi [21,22Fjölmargar rannsóknir hafa staðfest að miðlungsmikil þurrkálag stuðlaði að uppsöfnun flavonoida. Lang Duo-Yong o.fl. [23] bar saman áhrif þurrkaálags á YCH með því að stjórna vatnsbindingargetu á akrinum. Kom í ljós að þurrkaálag hamlaði vexti rótar að vissu marki, en við miðlungs og alvarlegt þurrkaálag (40% vatnsbindingargeta á akrinum) jókst heildarinnihald flavonoids í YCH. Á sama tíma, við þurrkaálag, geta plöntusteról virkað til að stjórna vökva og gegndræpi frumuhimna, hamla vatnsmissi og bæta streituþol [24,25Þess vegna gæti aukin uppsöfnun heildarflavonoíða, heildarsteróla, betaíns, trígónelíns og annarra afleiddra umbrotsefna í villtum YCH tengst mikilli þurrkastreitu.Í þessari rannsókn var KEGG ferilsgreining framkvæmd á umbrotsefnum sem reyndust vera marktækt ólík milli villtra og ræktaðra YCH. Auðguðu umbrotsefnin innihéldu þau sem taka þátt í umbrotum askorbats og aldarats, myndun amínóasýl-tRNA, umbrotum histidíns og umbrotum beta-alaníns. Þessar umbrotsleiðir eru nátengdar streituþolsferlum plantna. Meðal þeirra gegnir umbrot askorbats mikilvægu hlutverki í framleiðslu andoxunarefna plantna, kolefnis- og köfnunarefnisefnaskiptum, streituþoli og öðrum lífeðlisfræðilegum starfsemi [26Myndun amínóasýl-tRNA er mikilvæg leið fyrir próteinmyndun [27,28], sem tekur þátt í myndun streituþolinna próteina. Bæði histidín- og β-alanínferlar geta aukið þol plantna fyrir umhverfisálagi [29,30Þetta bendir enn fremur til þess að munurinn á umbrotsefnum milli villtra og ræktaðra YCH-plantna tengist náið ferlum streituþols.Jarðvegur er undirstaða vaxtar og þroska lækningajurta. Köfnunarefni (N), fosfór (P) og kalíum (K) í jarðvegi eru mikilvæg næringarefni fyrir vöxt og þroska plantna. Lífrænt efni í jarðvegi inniheldur einnig N, P, K, Zn, Ca, Mg og önnur stór og snefilefni sem lækningajurtir þurfa. Of mikil eða skortur á næringarefnum, eða ójafnvægi í hlutföllum næringarefna, hefur áhrif á vöxt og þroska og gæði lækningaefna, og mismunandi plöntur hafa mismunandi næringarþarfir [31,32,33Til dæmis jók lágt köfnunarefnisinnihald myndun alkalóíða í Isatis indigotica og var gagnlegt fyrir uppsöfnun flavonoida í plöntum eins og Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge og Dichondra repens Forst. Aftur á móti hamlaði of mikið köfnunarefni uppsöfnun flavonoida í tegundum eins og Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis og Ginkgo biloba og hafði áhrif á gæði lyfjaefna [34Notkun fosfóráburðar var áhrifarík til að auka innihald glýsýrrísínsýru og díhýdróasetóns í lakkrísgrjónum frá Úralí [35Þegar áburðarmagnið fór yfir 0,12 kg, m−2, minnkaði heildarinnihald flavoníða í Tussilago farfara [36Notkun fosfóráburðar hafði neikvæð áhrif á innihald fjölsykra í hefðbundinni kínverskri lækningajurt, rhizoma polygonati [37], en K-áburður var áhrifaríkur við að auka saponínainnihald þess [38]. Að bera á 450 kg·hm−2 K áburð var best fyrir vöxt og sapónínuppsöfnun tveggja ára gamals Panax notoginseng [39]. Við hlutfallið N:P:K = 2:2:1 var heildarmagn vatnshitaþykknis, harpagíðs og harpagósíðs hæst [40]. Hátt hlutfall N, P og K var gagnlegt til að efla vöxt Pogostemon cablin og auka innihald rokgjörnrar olíu. Lágt hlutfall N, P og K jók innihald helstu virku innihaldsefnanna í stofnlaufolíu Pogostemon cablin [41]. YCH er ófrjósamur jarðvegsþolinn planta og gæti haft sérstakar þarfir fyrir næringarefni eins og köfnunarefni (N), fosfór (P) og kalíum (K). Í þessari rannsókn, samanborið við ræktaða YCH, var jarðvegur villtra YCH-plantna tiltölulega ófrjósamur: innihald lífræns efnis í jarðveginum, heildarköfnunarefni (N), heildarfosfór (P) og heildarkalíum (K) var um 1/10, 1/2, 1/3 og 1/3 af því sem er í ræktuðum plöntum, talið í sömu röð. Þess vegna gæti munurinn á næringarefnum í jarðvegi verið önnur ástæða fyrir mismuninum á umbrotsefnum sem greindust í ræktaðri og villtri YCH. Weibao Ma o.fl. [42] kom í ljós að notkun ákveðins magns af köfnunarefnis- og fosfóráburði bætti verulega uppskeru og gæði fræja. Hins vegar er áhrif næringarefna á gæði YCH ekki ljós og frekari rannsókna þarf á áburðaraðgerðum til að bæta gæði lyfjaefna.Kínversk náttúrulyf hafa þá eiginleika að „hagstæð búsvæði stuðla að uppskeru og óhagstæð búsvæði bæta gæði“.43]. Í ferlinu þar sem smám saman breyttist frá villtri YCH yfir í ræktaða YCH breyttist búsvæði plantnanna úr þurrum og hrjóstrugum eyðimerkursteppum í frjósamt ræktarland með meira vatni. Búsvæði ræktaðrar YCH eru betri og uppskeran hærri, sem hjálpar til við að mæta eftirspurn á markaði. Hins vegar leiddi þetta betri búsvæði til verulegra breytinga á umbrotsefnum YCH; hvort þetta stuðlar að því að bæta gæði YCH og hvernig ná megi hágæða framleiðslu á YCH með vísindalegum ræktunaraðgerðum krefst frekari rannsókna.Hermun á búsvæðisræktun er aðferð til að herma eftir búsvæðum og umhverfisaðstæðum villtra lækningajurta, byggð á þekkingu á langtímaaðlögun plantnanna að tilteknu umhverfisálagi [43Með því að herma eftir ýmsum umhverfisþáttum sem hafa áhrif á villtar plöntur, sérstaklega upprunalegt búsvæði plantna sem notaðar eru sem uppspretta ósvikinna lækningaefna, notar aðferðin vísindalega hönnun og nýstárlegar mannlegar íhlutunaraðferðir til að jafna vöxt og aukaefnaskipti kínverskra lækningajurta [43]. Aðferðirnar miða að því að ná sem bestum árangri við þróun hágæða lyfjaefna. Hermun á búsvæðum ætti að veita árangursríka leið til hágæða framleiðslu á YCH, jafnvel þegar lyfhrif, gæðavísar og svörunarferlar við umhverfisþáttum eru óljós. Því leggjum við til að vísindaleg hönnun og stjórnunaraðgerðir á vettvangi við ræktun og framleiðslu á YCH verði framkvæmdar með vísan til umhverfiseiginleika villtrar YCH, svo sem þurrar, hrjóstrugar og sandkenndar jarðvegsaðstæður. Á sama tíma er einnig vonast til að vísindamenn muni framkvæma ítarlegri rannsóknir á virkni efnisgrunni og gæðavísum YCH. Þessar rannsóknir geta veitt skilvirkari matsviðmið fyrir YCH og stuðlað að hágæða framleiðslu og sjálfbærri þróun iðnaðarins. -
Jurtaolía Fructus Amomi Náttúruleg nudddreifari 1 kg Lausn Amomum villosum ilmkjarnaolía
Ættbálkurinn Zingiberaceae hefur vakið aukna athygli í rannsóknum á allelopatískum efnum vegna ríkulegra rokgjarnra olíu og ilmeiginleika tegundanna sem tilheyra honum. Fyrri rannsóknir höfðu sýnt að efnin úr Curcuma zedoaria (zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [ ],41] og Zingiber officinale Rosc. [42] af engiferættinni hafa allelopatísk áhrif á spírun fræja og vöxt fræplantna í maís, salati og tómötum. Núverandi rannsókn okkar er fyrsta skýrslan um allelopatíska virkni rokgjörna efna úr stilkum, laufum og ungum ávöxtum A. villosum (meðlimur af Zingiberaceae ættinni). Olíuuppskera úr stilkum, laufum og ungum ávöxtum var 0,15%, 0,40% og 0,50%, talið í sömu röð, sem bendir til þess að ávextir framleiddu meira magn af rokgjörnum olíum en stilkar og lauf. Helstu innihaldsefni rokgjörnna olíu úr stilkum voru β-pínen, β-fellandren og α-pínen, sem var svipað mynstur og í helstu efnum í laufolíu, β-pínen og α-pínen (mónóterpen kolvetni). Hins vegar var olían í ungum ávöxtum rík af bornaýlasetati og kamfóru (súrefnisríkum mónóterpenum). Niðurstöðurnar voru studdar af niðurstöðum Do N Dai [30,32] og Hui Ao [31] sem höfðu borið kennsl á olíurnar úr mismunandi líffærum A. villosum.
Nokkrar skýrslur hafa verið gerðar um vaxtarhamlandi virkni þessara helstu efnasambanda í öðrum tegundum. Shalinder Kaur komst að því að α-pínen úr eukalyptus minnkaði verulega rótarlengd og sprothæð Amaranthus viridis L. við 1,0 μL styrk [43], og önnur rannsókn sýndi að α-pínen hamlaði snemmbúnum rótarvexti og olli oxunarskemmdum í rótarvef með aukinni myndun hvarfgjarnra súrefnistegunda [44Í sumum skýrslum hefur verið haldið fram að β-pínen hamli spírun og vexti fræplantna í tilraunaillgresi á skammtaháðan hátt með því að raska heilleika himnunnar [45], sem breytir lífefnafræði plantna og eykur virkni peroxídasa og pólýfenóloxídasa [46]. β-Phellandren sýndi hámarks hömlun á spírun og vexti Vigna unguiculata (L.) Walp við styrk upp á 600 ppm [47], en við styrk upp á 250 mg/m3, hamlaði kamfóra vöxt rótar- og sprotavaxna Lepidium sativum L. [48]. Hins vegar eru rannsóknir sem sýna fram á allelopatíska áhrif bornaýlasetats takmarkaðar. Í okkar rannsókn voru allelopatísk áhrif β-pínens, bornaýlasetats og kamfóra á rótarlengd veikari en fyrir rokgjörn olíur nema fyrir α-pínen, en laufolía, sem er rík af α-píneni, var einnig eituráhrifaríkari fyrir plöntur en samsvarandi rokgjörn olíur úr stilkum og ávöxtum A. villosum, og báðar niðurstöður benda til þess að α-pínen gæti verið mikilvægt efni fyrir allelopatíu hjá þessari tegund. Á sama tíma bentu niðurstöðurnar einnig til þess að sum efnasambönd í ávaxtaolíunni, sem voru ekki mikið til, gætu stuðlað að eituráhrifum fyrir plöntur, en sú niðurstaða þarfnast frekari rannsókna í framtíðinni.Við eðlilegar aðstæður eru allelopatísk áhrif alleloefna tegundarbundin. Jiang o.fl. komust að því að ilmkjarnaolía framleidd af Artemisia sieversiana hafði öflugri áhrif á Amaranthus retroflexus L. en á Medicago sativa L., Poa annua L. og Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng.49Í annarri rannsókn olli rokgjörn olía úr Lavandula angustifolia Mill. mismunandi eituráhrifum á plöntur á mismunandi plöntutegundir. Lolium multiflorum Lam. var næmasta viðtakategundin, þar sem vöxtur kímblaða og rótarblaða hamlaðist um 87,8% og 76,7%, talið í sömu röð, við skammtinn 1 μL/mL af olíu, en vöxtur kímblaða gúrkuplöntunnar hafði lítil áhrif [20Niðurstöður okkar sýndu einnig að munur var á næmi fyrir rokgjörnum efnum í A. villosum milli L. sativa og L. perenne.Rokgjarnar efnasambönd og ilmkjarnaolíur sömu tegundar geta verið mismunandi að magni og/eða eigindlegum vegna vaxtarskilyrða, plöntuhluta og greiningaraðferða. Til dæmis sýndi skýrsla að pýranóíð (10,3%) og β-karýófýlen (6,6%) voru helstu efnasambönd rokgjörnu efnanna sem losnuðu úr laufum Sambucus nigra, en bensaldehýð (17,8%), α-búlnesen (16,6%) og tetrakósan (11,5%) voru algeng í olíunum sem unnar voru úr laufum [50Í okkar rannsókn höfðu rokgjörn efnasambönd sem ferskt plöntuefni losaði sterkari allelopatísk áhrif á tilraunaplönturnar en útdregna rokgjörnu olíurnar, þar sem munurinn á svörun tengdist náið mismuninum á alleloefnafræðilegum efnum sem eru til staðar í efnablöndunum tveimur. Nákvæmur munur á rokgjörnum efnasamböndum og olíum þarf að rannsaka frekar í síðari tilraunum.Mismunur á örverufjölbreytni og uppbyggingu örverusamfélaga í jarðvegssýnum þar sem rokgjörnum olíum hafði verið bætt við tengdist samkeppni milli örvera sem og eituráhrifum og lengd rokgjörnra olíu í jarðveginum. Vokou og Liotiri [51] kom í ljós að notkun fjögurra ilmkjarnaolía (0,1 ml) í ræktaðan jarðveg (150 g) virkjaði öndun jarðvegssýnanna, jafnvel þótt olíurnar væru mismunandi að efnasamsetningu, sem bendir til þess að jurtaolíur séu notaðar sem kolefnis- og orkugjafi af jarðvegsörverum. Gögn sem fengust úr þessari rannsókn staðfestu að olíur úr allri plöntunni af A. villosum stuðlaðu að augljósri aukningu á fjölda jarðvegssveppategunda á 14. degi eftir að olíu var bætt við, sem bendir til þess að olían gæti veitt kolefnisgjafa fyrir fleiri jarðvegssveppi. Önnur rannsókn greindi frá niðurstöðu: jarðvegsörverur endurheimtu upphaflega virkni sína og lífmassa eftir tímabundið tímabil breytinga sem framkölluð voru með viðbót Thymbra capitata L. (Cav) olíu, en olían í hæsta skammti (0,93 µL af olíu á hvert gramm af jarðvegi) leyfði ekki jarðvegsörverum að endurheimta upphaflega virkni sína [52]. Í þessari rannsókn, sem byggir á örverufræðilegri greiningu á jarðvegi eftir meðhöndlun með mismunandi dögum og styrk, gerðum við ráð fyrir að bakteríusamfélag jarðvegsins myndi ná sér eftir fleiri daga. Hins vegar getur sveppaflóran ekki snúið aftur í upprunalegt ástand. Eftirfarandi niðurstöður staðfesta þessa tilgátu: greinileg áhrif mikils styrks olíunnar á samsetningu sveppaflórunnar í jarðvegi komu í ljós með aðalhnitgreiningu (PCoA), og hitakortsframsetningar staðfestu enn og aftur að samsetning sveppasamfélagsins í jarðveginum sem meðhöndlaður var með 3,0 mg/ml olíu (þ.e. 0,375 mg af olíu á hvert gramm af jarðvegi) á ættkvíslarstigi var verulega frábrugðin öðrum meðhöndlunum. Eins og er eru rannsóknir á áhrifum viðbótar einóterpen kolvetna eða súrefnisríkra einóterpena á örverufjölbreytni og samfélagsbyggingu jarðvegs enn af skornum skammti. Nokkrar rannsóknir hafa greint frá því að α-pínen jók örveruvirkni jarðvegs og hlutfallslegt magn Methylophilaceae (hópur metýlótrófa, Proteobacteria) við lágt rakainnihald og gegnir mikilvægu hlutverki sem kolefnisgjafi í þurrari jarðvegi [53Á sama hátt er rokgjörn olía úr heilli plöntu af A. villosum, sem inniheldur 15,03% α-pínen (Viðbótartafla S1), jók greinilega hlutfallslegan fjölda próteobaktería við 1,5 mg/ml og 3,0 mg/ml, sem bendir til þess að α-pínen geti hugsanlega verið ein af kolefnisgjöfum fyrir örverur í jarðvegi.Rokgjarnar efnasambönd sem framleidd voru af mismunandi líffærum A. villosum höfðu mismunandi miklar allelopathískar áhrif á L. sativa og L. perenne, sem tengdist náið efnasamsetningum plöntuhluta A. villosum. Þó að efnasamsetning rokgjörnu olíunnar hafi verið staðfest, eru rokgjörnu efnin sem losna frá A. villosum við stofuhita óþekkt, sem þarfnast frekari rannsókna. Ennfremur er samverkandi áhrif milli mismunandi allelochemicals einnig vert að skoða. Hvað varðar örverur í jarðvegi, til að kanna áhrif rokgjörnu olíunnar á örverur í jarðvegi á ítarlegan hátt, þurfum við enn að framkvæma ítarlegri rannsóknir: lengja meðferðartíma rokgjörnu olíunnar og greina breytileika í efnasamsetningu rokgjörnu olíunnar í jarðveginum á mismunandi dögum. -
Hrein Artemisia capillaris olía fyrir kerta- og sápuframleiðslu, heildsölu ilmkjarnaolía fyrir dreifara, ný fyrir reyrbrennara.
Hönnun nagdýralíkana
Dýrunum var skipt af handahófi í fimm hópa, fimmtán músum í hverjum. Mýsnar í samanburðarhópnum og í fyrirmyndarhópnum fengu magafyllingu.sesamolíaí 6 daga. Mýs í jákvæðum samanburðarhópi voru gefin bifendat töflur (BT, 10 mg/kg) með maga í 6 daga. Tilraunahóparnir voru meðhöndlaðir með 100 mg/kg og 50 mg/kg AEO uppleyst í sesamolíu í 6 daga. Á degi 6 var samanburðarhópurinn meðhöndlaður með sesamolíu og allir hinir hóparnir fengu stakan skammt af 0,2% CCl4 í sesamolíu (10 ml/kg) með því að gefa þeiminndæling í kviðarholMýsnar voru síðan fastaðar vatnslausar og blóðsýni voru tekin úr æðum aftan á augnbotninum; safnað blóð var skilvindað við 3000 ×gí 10 mínútur til að aðskilja serumið.Hálsliðrunvar framkvæmt strax eftir blóðtöku og lifrarsýni voru tekin tafarlaust. Einn hluti lifrarsýnisins var geymdur strax við −20°C þar til greining fór fram og annar hluti var skorinn út og festur í 10%formalínlausn; eftirstandandi vefir voru geymdir við −80°C til vefjameinafræðilegrar greiningar (Wang o.fl., 2008,Hsu o.fl., 2009,Nie o.fl., 2015).
Mæling á lífefnafræðilegum breytum í sermi
Lifrarskaði var metinn með því að áætlaensímvirkniá ALT og AST í sermi með því að nota samsvarandi hefðbundin pökk samkvæmt leiðbeiningum fyrir pökkin (Nanjing, Jiangsu hérað, Kína). Ensímvirknin var gefin upp sem einingar á lítra (U/l).
Mæling á MDA, SOD, GSH og GSH-Pxí lifrarhomogenötum
Lifrarvefirnir voru jafnaðir með köldu lífeðlisfræðilegu saltvatni í hlutföllunum 1:9 (w/v, lifur:saltvatn). Jafnvægið var skilvindað (2500 ×g(í 10 mínútur) til að safna ofanvökvanum fyrir síðari ákvarðanir. Lifrarskemmdir voru metnar samkvæmt lifrarmælingum á MDA og GSH gildum sem og SOD og GSH-Pxvirkni. Öll þessi voru ákvörðuð samkvæmt leiðbeiningum á búnaðinum (Nanjing, Jiangsu héraði, Kína). Niðurstöðurnar fyrir MDA og GSH voru tjáðar sem nmól á mg af próteini (nmól/mg prótein) og virkni SOD og GSH-Pxvoru tjáð sem U á mg próteina (U/mg prótín).
Vefjafræðileg greining
Hlutar af nýfenginni lifur voru festir í 10% stuðpúða.paraformaldehýðfosfatlausn. Sýnið var síðan fellt inn í paraffín, skorið í 3–5 μm sneiðar og litað meðhematoxýlínogeósín(H&E) samkvæmt stöðluðu ferli og að lokum greint meðljóssmásjá(Tian o.fl., 2012).
Tölfræðileg greining
Niðurstöðurnar voru birtar sem meðaltal ± staðalfrávik (SD). Niðurstöðurnar voru greindar með tölfræðiforritinu SPSS Statistics, útgáfu 19.0. Gögnin voru tekin með breytileikagreiningu (ANOVA,p< 0,05) og síðan Dunnett-próf og Dunnett-T3-próf til að ákvarða tölfræðilega marktækan mun á gildum hinna ýmsu tilraunahópa. Marktækur munur var talinn vera á stigip< 0,05.
Niðurstöður og umræða
Innihaldsefni AEO
Við GC/MS greiningu kom í ljós að AEO innihélt 25 efni sem voru skoluð út á 10 til 35 mínútum og 21 efni sem námu 84% af ilmkjarnaolíunni greindist (Tafla 1). Rokgjarna olían sem innihélteinþeterpenóíð(80,9%), seskvíterpenóíð (9,5%), mettuð ógreinótt kolvetni (4,86%) og ýmis asetýlen (4,86%). Samanborið við aðrar rannsóknir (Guo o.fl., 2004), fundum við mikið magn af mónóterpenóíðum (80,90%) í AEO. Niðurstöðurnar sýndu að algengasta innihaldsefnið í AEO er β-sítrónellól (16,23%). Önnur helstu innihaldsefni AEO eru 1,8-síneól (13,9%),kamfóra(12,59%),linalól(11,33%), α-pinen (7,21%), β-pinen (3,99%),þýmól(3,22%), ogmyrcen(2,02%). Breytingin á efnasamsetningu gæti tengst umhverfisaðstæðum sem plantan varð fyrir, svo sem steinefnavatni, sólarljósi, þroskastigi ognæring.
-
Hrein Saposhnikovia divaricata olía fyrir kerta- og sápuframleiðslu, ilmkjarnaolía í heildsölu, ný fyrir reyrbrennara.
2.1. Undirbúningur SDE
Þurrkaðir rhizomes af SD voru keyptir sem þurrkaðir jurtir frá Hanherb Co. (Guri, Kóreu). Efnið í plöntunni var staðfest flokkunarfræðilega af Dr. Go-Ya Choi frá Kóreustofnun austurlenskra lækninga (KIOM). Sýnishorn (númer 2014 SDE-6) var geymt í kóreska grasbaríinu fyrir staðlaðar jurtalækningar. Þurrkaðir rhizomes af SD (320 g) voru dregnir út tvisvar með 70% etanóli (með 2 klst. bakflæði) og útdrátturinn síðan þykktur við lækkaðan þrýsting. Seyðið var síað, frostþurrkað og geymt við 4°C. Afköst þurrkaðs útdráttar úr hráu upphafsefni voru 48,13% (w/w).
2.2. Megindleg háafköstavökvaskiljun (HPLC) greining
Krómatografísk greining var framkvæmd með HPLC kerfi (Waters Co., Milford, MA, Bandaríkjunum) og ljósdíóðufylkisnema. Fyrir HPLC greiningu á SDE var frum-O-glúkósýlsímífúgín staðallinn var keyptur frá Kóreu kynningarstofnuninni fyrir hefðbundna lækningaiðnaðinn (Gyeongsan, Kóreu), ogsek-O-glúkósýlhamaudól og 4′-O-β-D-glúkósýl-5-O1-metýlvisamminól var einangrað í rannsóknarstofu okkar og greind með litrófsgreiningum, aðallega með NMR og MS.
SDE sýni (0,1 mg) voru leyst upp í 70% etanóli (10 ml). Litskiljunaraðskilnaður var framkvæmdur með XSelect HSS T3 C18 dálki (4,6 × 250 mm, 5μ(m, Waters Co., Milford, MA, Bandaríkjunum). Færanlega fasinn samanstóð af asetónítríli (A) og 0,1% ediksýru í vatni (B) við rennslishraða 1,0 ml/mín. Fjölþrepa hallakerfi var notað sem hér segir: 5% A (0 mín.), 5–20% A (0–10 mín.), 20% A (10–23 mín.) og 20–65% A (23–40 mín.). Greiningarbylgjulengdin var skönnuð við 210–400 nm og skráð við 254 nm. Inndælingarrúmmálið var 10,0μL. Staðlaðar lausnir til að ákvarða þrjá krómóna voru útbúnar með lokastyrk upp á 7,781 mg/ml (frum-O-glúkósýlsímífúgín), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glúkósýl-5-O-metýlvisamminól) og 31,125 mg/ml (sek-O-glúkósýlhamaudól) í metanóli og geymt við 4°C.
2.3. Mat á bólgueyðandi virkniÍ tilraunaglasi
2.3.1. Frumuræktun og sýnismeðferð
RAW 264.7 frumur voru fengnar úr American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, Bandaríkjunum) og ræktaðar í DMEM miðli sem innihélt 1% sýklalyf og 5,5% FBS. Frumurnar voru ræktaðar í rakaðri andrúmslofti með 5% CO2 við 37°C. Til að örva frumurnar var miðlinum skipt út fyrir ferskt DMEM miðil og lípópólýsakkaríð (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, Bandaríkjunum) við 1μg/ml var bætt við hvort sem SDE var til staðar eða ekki (200 eða 400μg/ml) í 24 klst. til viðbótar.
2.3.2. Ákvörðun á köfnunarefnisoxíði (NO), prostaglandíni E2 (PGE2), æxlisdrepsþætti-α(TNF-α), og framleiðsla á interleukin-6 (IL-6)
Frumur voru meðhöndlaðar með SDE og örvaðar með LPS í 24 klst. NO framleiðsla var greind með því að mæla nítrít með því að nota Griess hvarfefnið samkvæmt fyrri rannsókn [12Seyting bólguvaldandi frumuboðefna PGE2, TNF-αog IL-6 var ákvarðað með ELISA-setti (R&D kerfi) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Áhrif SDE á NO og frumuboðefnaframleiðslu voru ákvörðuð við 540 nm eða 450 nm með Wallac EnVision.™Örplötulesari (PerkinElmer).
2.4. Mat á virkni gegn slitgigtÍ lífveru
2.4.1. Dýr
Karlkyns Sprague-Dawley rottur (7 vikna gamlar) voru keyptar frá Samtako Inc. (Osan, Kóreu) og hýstar við stýrðar aðstæður með 12 klst. ljós/myrkur hringrás.°C og% rakastig. Rottur fengu rannsóknarstofufóður og vatnað vildAllar tilraunir voru framkvæmdar í samræmi við leiðbeiningar bandarísku heilbrigðisstofnunarinnar (NIH) og samþykktar af dýraverndar- og notkunarnefnd Daejeon-háskóla (Daejeon, Lýðveldið Kórea).
2.4.2. Innleiðing slitgigtar með MIA í rottum
Dýrunum var slembiraðað og þeim úthlutað í meðferðarhópa áður en rannsóknin hófst (á hvern hóp). MIA lausn (3 mg/50μL af 0,9% saltlausn) var sprautað beint í liðrými hægra hnés undir svæfingu sem framkölluð var með blöndu af ketamíni og xýlazíni. Rottum var skipt af handahófi í fjóra hópa: (1) saltlausnarhópurinn án MIA inndælingar, (2) MIA hópurinn með MIA inndælingu, (3) SDE hópurinn sem fékk MIA inndælingu (200 mg/kg) og (4) indómetasín (IM-) hópurinn (2 mg/kg) og MIA inndælingu. Rottum var gefið SDE og IM til inntöku viku fyrir MIA inndælingu í 4 vikur. Skammturinn af SDE og IM sem notaður var í þessari rannsókn var byggður á þeim sem notaðir voru í fyrri rannsóknum [10,13,14].
2.4.3. Mælingar á þyngdardreifingu afturfótar
Eftir örvun slitgigtar rofnaði upphaflegt jafnvægi í burðargetu afturfótanna. Notað var ófærniprófari (Linton instrumentation, Norfolk, Bretlandi) til að meta breytingar á burðarþoli. Rotturnar voru vandlega settar í mælihólfið. Meðaltal burðarkrafts sem afturfóturinn beitti var reiknað yfir 3 sekúndna tímabil. Þyngdardreifingarhlutfallið var reiknað með eftirfarandi jöfnu: [þyngd á hægri afturfót/(þyngd á hægri afturfót + þyngd á vinstri afturfót)] × 100 [15].
2.4.4. Mælingar á sermisþéttni cýtókína
Blóðsýnin voru skiljuð með skilvindu við 1.500 g í 10 mínútur við 4°C; síðan var serminu safnað og geymt við −70°C þar til það var notað. Magn IL-1β, IL-6, TNF-αog PGE2 í sermi voru mæld með ELISA-settum frá R&D Systems (Minneapolis, MN, Bandaríkjunum) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.
2.4.5. Megindleg RT-PCR greining í rauntíma
Heildar-RNA var dregið út úr hnéslíðursvef með TRI-reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Bandaríkjunum), umritað í cDNA og PCR-magnað með TM One Step RT PCR-setti með SYBR-grænu (Applied Biosystems, Grand Island, NY, Bandaríkjunum). Megindleg PCR í rauntíma var framkvæmd með Applied Biosystems 7500 rauntíma PCR-kerfinu (Applied Biosystems, Grand Island, NY, Bandaríkjunum). Forritaraðirnar og rannsakaröðin eru sýnd í töflu.1Skammtar af cDNA sýninu og jafnmikið magn af GAPDH cDNA voru magnaðar upp með TaqMan® Universal PCR aðalblöndunni sem innihélt DNA pólýmerasa samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda (Applied Biosystems, Foster, CA, Bandaríkin). PCR skilyrði voru 2 mínútur við 50°C, 10 mínútur við 94°C, 15 sekúndur við 95°C og 1 mínúta við 60°C í 40 lotur. Styrkur markgens var ákvarðaður með samanburðar-Ct aðferðinni (þröskuldslotafjöldi við krosspunkt milli mögnunarrits og þröskulds), samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.
