Slitgigt (OA) er einn af langvarandi krónískum hrörnunarsjúkdómum í beinum sem herja á eldri íbúa eldri en 65 ára.
1]. Almennt greinast OA-sjúklingar með skemmd brjósk, bólgu í liðhimnu og veðruðum chondrocytes, sem kalla fram sársauka og líkamlega vanlíðan [
2]. Liðagigtarverkir stafa aðallega af hrörnun brjósks í liðum vegna bólgu og þegar brjóskið er alvarlega skaddað geta bein rekast hvert í annað og valdið óbærilegum sársauka og líkamlegum erfiðleikum [
3]. Þátttaka bólgumiðla með einkennum eins og sársauka, bólgu og stífleika í liðum er vel skjalfest. Hjá OA sjúklingum finnast bólgusýtókín, sem valda rof á brjóski og undirbúningsbeini, í liðvökva [
4]. Tvær helstu kvartanir sem OA sjúklingar hafa almennt eru verkir og liðbólgur. Þess vegna eru meginmarkmið núverandi OA meðferðar að draga úr sársauka og bólgu. [
5]. Þrátt fyrir að tiltækar OA meðferðir, þar með talið stera- og steralyf, hafi sýnt fram á virkni við að lina sársauka og bólgu, hefur langtímanotkun þessara lyfja alvarlegar heilsufarslegar afleiðingar eins og hjarta- og æðasjúkdóma, meltingarfæra- og nýrnasjúkdóma.
6]. Því þarf að þróa árangursríkara lyf með færri aukaverkunum til að meðhöndla slitgigt.
Náttúrulegar heilsuvörur verða sífellt vinsælli þar sem þær eru öruggar og aðgengilegar [
7]. Hefðbundin kóresk lyf hafa sannað virkni gegn nokkrum bólgusjúkdómum, þar á meðal liðagigt [
8]. Aucklandia lappa DC. er þekkt fyrir lækningaeiginleika sína, eins og að efla blóðrás Qi til að lina sársauka og róa magann, og hefur jafnan verið notað sem náttúrulegt verkjalyf.
9]. Fyrri skýrslur benda til þess að A. lappa sé með bólgueyðandi [
10,
11], verkjastillandi [
12], krabbameinslyf [
13], og magaverndandi [
14] áhrif. Hinar ýmsu líffræðilegu virkni A. lappa stafar af helstu virku efnasamböndunum: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone og costuslactone [
15]. Fyrri rannsóknir fullyrða að costunolide hafi sýnt bólgueyðandi eiginleika í lípópólýsykrum (LPS), sem framkallaði átfrumurnar með því að stjórna NF-kB og hitalostpróteinferli [
16,
17]. Engin rannsókn hefur hins vegar rannsakað hugsanlega virkni A. lappa fyrir OA meðferð. Núverandi rannsóknir hafa rannsakað meðferðaráhrif A. lappa gegn OA með því að nota (mónódíum-joðasetat) MIA og ediksýru-framkallaða nagdýralíkön.
Monosodium-jodoacetate (MIA) er frægt notað til að framleiða mikið af sársaukahegðun og meinalífeðlisfræðilegum einkennum OA hjá dýrum [
18,
19,
20]. Þegar MIA er sprautað í hnéliði truflar MIA efnaskipti chondrocyte og framkallar bólgu og bólgueinkenni, svo sem brjósk og beinveðrun undir kirtla, aðaleinkenni OA.
18]. Víða er litið á hryðjusvörun af völdum ediksýru sem eftirlíkingu af útlægum sársauka hjá dýrum þar sem hægt er að mæla bólguverki magnbundið [
19]. Músaátfrumufrumulína, RAW264.7, er almennt notuð til að rannsaka frumuviðbrögð við bólgu. Við virkjun með LPS virkja RAW264 átfrumur bólguferli og seyta nokkrum bólgumiðlum, eins og TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS og IL-6 [
20]. Þessi rannsókn hefur metið sýklalyf og bólgueyðandi áhrif A. lappa gegn OA í MIA dýralíkani, ediksýru-framkölluðu dýralíkani og LPS-virkjuðum RAW264.7 frumum.
2. Efni og aðferðir
2.1. Plöntuefni
Þurrkuð rót A. lappa DC. notað í tilrauninni var keypt frá Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Kóreu). Hann var auðkenndur af prófessor Donghun Lee, Dept. of Herbal Pharmacology, Col. of Korean Medicine, Gachon University, og númer fylgiskjalssýnis var afhent sem 18060301.
2.2. HPLC greining á A. lappa útdrætti
A. lappa var dregin út með bakflæðisbúnaði (eimað vatn, 3 klst við 100°C). Útdráttarlausnin var síuð og þétt með því að nota lágþrýstingsuppgufunartæki. A. lappa þykkni hafði 44,69% afrakstur eftir frostþurrkun við -80 °C. Litskiljunargreining á A. lappa var gerð með HPLC tengdum með 1260 InfinityⅡ HPLC-kerfi (Agilent, Pal Alto, CA, Bandaríkjunum). Fyrir litskiljun var EclipseXDB C18 súla (4,6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) notuð við 35 °C. Alls voru 100 mg af sýninu þynnt í 10 ml af 50% metanóli og hljóðbeitt í 10 mínútur. Sýnin voru síuð með sprautusíu (Waters Corp., Milford, MA, Bandaríkjunum) sem var 0,45 μm. Farfasasamsetningin var 0,1% fosfórsýra (A) og asetónítríl (B) og súlan var skoluð á eftirfarandi hátt: 0–60 mín, 0%; 60–65 mín., 100%; 65–67 mín., 100%; 67–72 mín., 0% leysi B með flæðihraða 1,0 ml/mín. Frárennslisvatnið sást við 210 nm með því að nota 10 μL inndælingarrúmmál. Greiningin var gerð í þríriti.
2.3. Dýrahald og stjórnun
Karlkyns Sprague-Dawley (SD) rottur á aldrinum 5 vikna og karlkyns ICR mýs á aldrinum 6 vikna voru keyptar frá Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Kóreu). Dýrum var haldið í herbergi með stöðugu hitastigi (22 ± 2 °C) og rakastigi (55 ± 10%) og ljós/myrkri hringrás upp á 12/12 klst. Dýrin kynntust ástandinu í meira en viku áður en tilraunin hófst. Dýr höfðu fóður og vatn að vild. Núverandi siðareglur um umhirðu og meðhöndlun dýra við Gachon háskólann (GIACUC-R2019003) var stranglega fylgt í öllum dýratilraunum. Rannsóknin var hönnuð rannsakanda-blind og samhliða rannsókn. Við fylgdum líknardrápsaðferðinni samkvæmt leiðbeiningum dýratilraunasiðanefndar.
2.4. MIA inndæling og meðferð
Rottum var skipt af handahófi í 4 hópa, þ.e. sham, control, indomethacin og A. lappa. Rotturnar voru svæfðar með 2% ísóflúoran O2 blöndu og voru sprautaðar með því að nota 50 μL af MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Bandaríkjunum) í lið í hnéliðum til að leiða til tilraunabólgusjúkdóms. Meðferðin var framkvæmd eins og hér að neðan: viðmiðunar- og sýndarhópum var aðeins viðhaldið með AIN-93G grunnfæði. Einungis var indomethacin hópurinn útvegaður með indómetasíni (3 mg/kg) innlimað í AIN-93G mataræði og A. lappa 300 mg/kg hópur var úthlutað í AIN-93G mataræði ásamt A. lappa (300 mg/kg). Meðferðunum var haldið áfram í 24 daga frá þeim degi sem OA var framkallað með hraðanum 15–17 g á 190–210 g líkamsþyngdar á dag.
2.5. Þyngdarmæling
Eftir OA framköllun var burðarþolsmæling á afturútlimum rottanna framkvæmd með incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, Bandaríkjunum) eins og áætlað var. Þyngdardreifing á afturlimum var reiknuð út: burðarþol (%)
