Slitgigt (OA) er einn af langvinnum hrörnunarsjúkdómum í beinum og liðum sem hefur áhrif á aldrað fólk eldri en 65 ára [
1Almennt eru sjúklingar með slitgigt greindir með skaddaða brjóskvef, bólgna liðhimnu og rofna brjóskfrumur, sem valda verkjum og líkamlegri vanlíðan [
2Liðagigtarverkir eru aðallega af völdum bólgu í brjóski í liðum og þegar brjóskið er alvarlega skemmt geta bein rekist saman og valdið óbærilegum sársauka og líkamlegum erfiðleikum.
3Þátttaka bólguvaldandi miðlara með einkennum eins og verkjum, bólgu og stirðleika í lið er vel skjalfest. Hjá sjúklingum með slitgigt finnast bólguvaldandi frumuboðefni, sem valda rofi á brjóski og undirbrjóski, í liðvökvanum [
4Tvær helstu kvartanir sem sjúklingar með slitgigt hafa almennt eru verkir og bólga í liðvöðvum. Þess vegna eru aðalmarkmið núverandi meðferða við slitgigt að draga úr verkjum og bólgu. [
5Þó að tiltækar meðferðir við slitgigt, þar á meðal lyf sem ekki eru sterar og sterar, hafi sannað virkni sína við að draga úr verkjum og bólgu, hefur langtímanotkun þessara lyfja alvarlegar heilsufarslegar afleiðingar, svo sem hjarta- og æðasjúkdóma, meltingarfærasjúkdóma og nýrnasjúkdóma [
6Því þarf að þróa áhrifaríkara lyf með færri aukaverkunum til meðferðar við slitgigt.
Náttúrulegar heilsuvörur eru sífellt vinsælli vegna þess að þær eru öruggar og auðfáanlegar [
7Hefðbundin kóresk lyf hafa sannað virkni sína gegn ýmsum bólgusjúkdómum, þar á meðal liðagigt [
8]. Aucklandia lappa DC. er þekkt fyrir lækningamátt sinn, svo sem að auka blóðrásina til að lina verki og róa magann, og hefur verið notað hefðbundið sem náttúrulegt verkjalyf [
9]. Fyrri skýrslur benda til þess að A. lappa hafi bólgueyðandi eiginleika [
10,
11], verkjalyf [
12], krabbameinslyf [
13], og magaverndandi [
14] áhrif. Ýmsar líffræðilegar virkni A. lappa er af völdum helstu virku efnasambanda þess: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone og costuslactone [
15Fyrrnefndar rannsóknir fullyrða að kostúnólíð hafi sýnt bólgueyðandi eiginleika í lípópólýsakkaríði (LPS), sem örvaði átfrumurnar með stjórnun á NF-kB og hitasjokkpróteinferlinu [
16,
17]. Hins vegar hefur engin rannsókn kannað hugsanlega virkni A. lappa við meðferð slitgigtar. Í þessari rannsókn hefur verið rannsakað meðferðaráhrif A. lappa gegn slitgigt með því að nota (mononatríumjoðasetat) MIA og ediksýruframkölluð nagdýralíkön.
Monónatríumjoðasetat (MIA) er þekkt fyrir að vera notað til að valda miklum hluta af sársaukahegðuninni og sjúkdómsvaldandi einkennum slitgigtar hjá dýrum [.
18,
19,
20Þegar MIA er sprautað í hnéliði raskar það efnaskiptum brjóskfrumna og veldur bólgu og bólgueinkennum, svo sem rofi á brjóski og undirbrjóski, sem eru helstu einkenni slitgigtar [
18]. Vöðvasvörun framkölluð með ediksýru er almennt talin herma eftir útlægum verkjum hjá dýrum þar sem hægt er að mæla bólguverki megindlega [
19]. Músarátfrumulínan RAW264.7 er vinsæl til að rannsaka frumuviðbrögð við bólgu. Við virkjun með LPS virkja RAW264 átfrumur bólguleiðir og seyta nokkrum bólgumiðlara, svo sem TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS og IL-6 [
20Þessi rannsókn hefur metið sársaukastillandi og bólgueyðandi áhrif A. lappa gegn slitgigt í dýralíkönum með MIA, dýralíkönum með ediksýruörvun og LPS-virkjuðum RAW264.7 frumum.
2. Efni og aðferðir
2.1. Plöntuefni
Þurrkuð rót A. lappa DC. sem notuð var í tilrauninni var fengin frá Epulip Pharmaceutical Co., Ltd. (Seúl, Kóreu). Hún var auðkennd af prófessor Donghun Lee, deild náttúrulyfjafræði, deild kóreskrar læknisfræði við Gachon-háskóla, og sýnishornsnúmerið var afhent sem 18060301.
2.2. HPLC greining á A. lappa útdrætti
A. lappa var einangrað með bakflæðisbúnaði (eimað vatn, 3 klst. við 100°C). Útdregna lausnin var síuð og þétt með lágþrýstingsuppgufunartæki. A. lappa útdrátturinn hafði 44,69% afköst eftir frostþurrkun við −80°C. Litskiljunargreining á A. lappa var framkvæmd með HPLC tengdum við 1260 InfinityⅡ HPLC-kerfi (Agilent, Pal Alto, CA, Bandaríkin). Fyrir litskiljun var notuð EclipseXDB C18 súla (4,6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) við 35°C. Samtals 100 mg af sýninu voru þynnt í 10 ml af 50% metanóli og hljóðbeitt í 10 mínútur. Sýnin voru síuð með sprautusíu (Waters Corp., Milford, MA, Bandaríkin) með 0,45 µm þvermál. Samsetning hreyfanlega fasans var 0,1% fosfórsýra (A) og asetónítríl (B) og dálkurinn var skolaður út á eftirfarandi hátt: 0–60 mín., 0%; 60–65 mín., 100%; 65–67 mín., 100%; 67–72 mín., 0% leysiefni B með rennslishraða 1,0 ml/mín. Frárennslisvökvinn var skoðaður við 210 nm með því að nota 10 μL inndælingarrúmmál. Greiningin var framkvæmd í þríriti.
2.3. Húsnæði og umsjón dýra
Karlkyns Sprague-Dawley (SD) rottur, 5 vikna gamlar, og karlkyns ICR mýs, 6 vikna gamlar, voru keyptar frá Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Kóreu). Dýrin voru haldin í herbergi með stöðugum hita (22 ± 2 °C) og raka (55 ± 10%) og ljós/myrkur hringrás upp á 12/12 klst. Dýrin voru kynnt fyrir aðstæðunum í meira en viku áður en tilraunin hófst. Dýrin fengu að vild fóður og vatn. Núgildandi siðareglur um umhirðu og meðhöndlun dýra við Gachon háskólann (GIACUC-R2019003) voru stranglega fylgt í öllum dýratilraunum. Rannsóknin var hönnuð með blindri rannsóknaraðferð og samsíða rannsókn. Við fylgdum aflífunaraðferðinni samkvæmt leiðbeiningum siðanefndar um dýratilraunir.
2.4. Innspýting og meðferð við MIA
Rottum var skipt af handahófi í fjóra hópa, þ.e. sýndarhópa, samanburðarhópa, indómetasín og A. lappa. Rottunum var svæft með 2% ísóflúoran O2 blöndu og sprautað með 50 μL af MIA (40 mg/m²; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Bandaríkjunum) í lið í hné til að leiða til tilraunakenndrar slitgigtar. Meðferðirnar voru framkvæmdar á eftirfarandi hátt: samanburðarhópar og sýndarhópar fengu eingöngu AIN-93G grunnfæði. Aðeins indómetasínhópurinn fékk indómetasín (3 mg/kg) sem bætt var við AIN-93G mataræðið og hópnum sem fékk 300 mg/kg af A. lappa fékk AIN-93G mataræði ásamt A. lappa (300 mg/kg). Meðferðunum var haldið áfram í 24 daga frá þeim degi sem slitgigt var framkölluð, í skömmtum sem voru 15–17 g á hver 190–210 g líkamsþyngdar á dag.
2.5. Mæling á þyngdarburði
Eftir örvun slitgigtar var burðargetumæling á afturfótum rottanna framkvæmd með incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, Kaliforníu, Bandaríkjunum) samkvæmt áætlun. Þyngdardreifingin á afturfótum var reiknuð út: burðargeta (%)
