Hrein Saposhnikovia divaricata olía fyrir kerta- og sápuframleiðslu, ilmkjarnaolía í heildsölu, ný fyrir reyrbrennara.

stutt lýsing:

2.1. Undirbúningur SDE

Þurrkaðir rhizomes af SD voru keyptir sem þurrkaðir jurtir frá Hanherb Co. (Guri, Kóreu). Efnið í plöntunni var staðfest flokkunarfræðilega af Dr. Go-Ya Choi frá Kóreustofnun austurlenskra lækninga (KIOM). Sýnishorn (númer 2014 SDE-6) var geymt í kóreska grasbaríinu fyrir staðlaðar jurtalækningar. Þurrkaðir rhizomes af SD (320 g) voru dregnir út tvisvar með 70% etanóli (með 2 klst. bakflæði) og útdrátturinn síðan þykktur við lækkaðan þrýsting. Seyðið var síað, frostþurrkað og geymt við 4°C. Afköst þurrkaðs útdráttar úr hráu upphafsefni voru 48,13% (w/w).

2.2. Megindleg háafköstavökvaskiljun (HPLC) greining

Krómatografísk greining var framkvæmd með HPLC kerfi (Waters Co., Milford, MA, Bandaríkjunum) og ljósdíóðufylkisnema. Fyrir HPLC greiningu á SDE var frum-O-glúkósýlsímífúgín staðallinn var keyptur frá Kóreu kynningarstofnuninni fyrir hefðbundna lækningaiðnaðinn (Gyeongsan, Kóreu), ogsek-O-glúkósýlhamaudól og 4′-O-β-D-glúkósýl-5-O1-metýlvisamminól var einangrað í rannsóknarstofu okkar og greind með litrófsgreiningum, aðallega með NMR og MS.

SDE sýni (0,1 mg) voru leyst upp í 70% etanóli (10 ml). Litskiljunaraðskilnaður var framkvæmdur með XSelect HSS T3 C18 dálki (4,6 × 250 mm, 5μ(m, Waters Co., Milford, MA, Bandaríkjunum). Færanlega fasinn samanstóð af asetónítríli (A) og 0,1% ediksýru í vatni (B) við rennslishraða 1,0 ml/mín. Fjölþrepa hallakerfi var notað sem hér segir: 5% A (0 mín.), 5–20% A (0–10 mín.), 20% A (10–23 mín.) og 20–65% A (23–40 mín.). Greiningarbylgjulengdin var skönnuð við 210–400 nm og skráð við 254 nm. Inndælingarrúmmálið var 10,0μL. Staðlaðar lausnir til að ákvarða þrjá krómóna voru útbúnar með lokastyrk upp á 7,781 mg/ml (frum-O-glúkósýlsímífúgín), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glúkósýl-5-O-metýlvisamminól) og 31,125 mg/ml (sek-O-glúkósýlhamaudól) í metanóli og geymt við 4°C.

2.3. Mat á bólgueyðandi virkniÍ tilraunaglasi

2.3.1. Frumuræktun og sýnismeðferð

RAW 264.7 frumur voru fengnar úr American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, Bandaríkjunum) og ræktaðar í DMEM miðli sem innihélt 1% sýklalyf og 5,5% FBS. Frumurnar voru ræktaðar í rakaðri andrúmslofti með 5% CO2 við 37°C. Til að örva frumurnar var miðlinum skipt út fyrir ferskt DMEM miðil og lípópólýsakkaríð (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, Bandaríkjunum) við 1μg/ml var bætt við hvort sem SDE var til staðar eða ekki (200 eða 400μg/ml) í 24 klst. til viðbótar.

2.3.2. Ákvörðun á köfnunarefnisoxíði (NO), prostaglandíni E2 (PGE2), æxlisdrepsþætti-α(TNF-α), og framleiðsla á interleukin-6 (IL-6)

Frumur voru meðhöndlaðar með SDE og örvaðar með LPS í 24 klst. NO framleiðsla var greind með því að mæla nítrít með því að nota Griess hvarfefnið samkvæmt fyrri rannsókn [12Seyting bólguvaldandi frumuboðefna PGE2, TNF-αog IL-6 var ákvarðað með ELISA-setti (R&D kerfi) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Áhrif SDE á NO og frumuboðefnaframleiðslu voru ákvörðuð við 540 nm eða 450 nm með Wallac EnVision.™Örplötulesari (PerkinElmer).

2.4. Mat á virkni gegn slitgigtÍ lífveru

2.4.1. Dýr

Karlkyns Sprague-Dawley rottur (7 vikna gamlar) voru keyptar frá Samtako Inc. (Osan, Kóreu) og hýstar við stýrðar aðstæður með 12 klst. ljós/myrkur hringrás.°C og% rakastig. Rottur fengu rannsóknarstofufóður og vatnað vildAllar tilraunir voru framkvæmdar í samræmi við leiðbeiningar bandarísku heilbrigðisstofnunarinnar (NIH) og samþykktar af dýraverndar- og notkunarnefnd Daejeon-háskóla (Daejeon, Lýðveldið Kórea).

2.4.2. Innleiðing slitgigtar með MIA í rottum

Dýrunum var slembiraðað og þeim úthlutað í meðferðarhópa áður en rannsóknin hófst (á hvern hóp). MIA lausn (3 mg/50μL af 0,9% saltlausn) var sprautað beint í liðrými hægra hnés undir svæfingu sem framkölluð var með blöndu af ketamíni og xýlazíni. Rottum var skipt af handahófi í fjóra hópa: (1) saltlausnarhópurinn án MIA inndælingar, (2) MIA hópurinn með MIA inndælingu, (3) SDE hópurinn sem fékk MIA inndælingu (200 mg/kg) og (4) indómetasín (IM-) hópurinn (2 mg/kg) og MIA inndælingu. Rottum var gefið SDE og IM til inntöku viku fyrir MIA inndælingu í 4 vikur. Skammturinn af SDE og IM sem notaður var í þessari rannsókn var byggður á þeim sem notaðir voru í fyrri rannsóknum [10,13,14].

2.4.3. Mælingar á þyngdardreifingu afturfótar

Eftir örvun slitgigtar rofnaði upphaflegt jafnvægi í burðargetu afturfótanna. Notað var ófærniprófari (Linton instrumentation, Norfolk, Bretlandi) til að meta breytingar á burðarþoli. Rotturnar voru vandlega settar í mælihólfið. Meðaltal burðarkrafts sem afturfóturinn beitti var reiknað yfir 3 sekúndna tímabil. Þyngdardreifingarhlutfallið var reiknað með eftirfarandi jöfnu: [þyngd á hægri afturfót/(þyngd á hægri afturfót + þyngd á vinstri afturfót)] × 100 [15].

2.4.4. Mælingar á sermisþéttni cýtókína

Blóðsýnin voru skiljuð með skilvindu við 1.500 g í 10 mínútur við 4°C; síðan var serminu safnað og geymt við −70°C þar til það var notað. Magn IL-1β, IL-6, TNF-αog PGE2 í sermi voru mæld með ELISA-settum frá R&D Systems (Minneapolis, MN, Bandaríkjunum) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.

2.4.5. Megindleg RT-PCR greining í rauntíma

Heildar-RNA var dregið út úr hnéslíðursvef með TRI-reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Bandaríkjunum), umritað í cDNA og PCR-magnað með TM One Step RT PCR-setti með SYBR-grænu (Applied Biosystems, Grand Island, NY, Bandaríkjunum). Megindleg PCR í rauntíma var framkvæmd með Applied Biosystems 7500 rauntíma PCR-kerfinu (Applied Biosystems, Grand Island, NY, Bandaríkjunum). Forritaraðirnar og rannsakaröðin eru sýnd í töflu.1Skammtar af cDNA sýninu og jafnmikið magn af GAPDH cDNA voru magnaðar upp með TaqMan® Universal PCR aðalblöndunni sem innihélt DNA pólýmerasa samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda (Applied Biosystems, Foster, CA, Bandaríkin). PCR skilyrði voru 2 mínútur við 50°C, 10 mínútur við 94°C, 15 sekúndur við 95°C og 1 mínúta við 60°C í 40 lotur. Styrkur markgens var ákvarðaður með samanburðar-Ct aðferðinni (þröskuldslotafjöldi við krosspunkt milli mögnunarrits og þröskulds), samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.

FOB verð:0,5 - 9.999 Bandaríkjadalir / Stykki

Lágmarks pöntunarmagn:100 stykki/stykki

Framboðsgeta:10000 stykki/stykki á mánuði

Senda okkur tölvupóst

Vöruupplýsingar

Vörumerki

Slitgigt (OA) er algengasta stoðkerfissjúkdómurinn og algengasti hrörnunarsjúkdómurinn í liðum hjá öldruðum [1]. Slitgigt er ástand sem að hluta til orsakast af meiðslum, tapi á brjóskbyggingu og virkni og truflunum á bólguvaldandi og bólgueyðandi ferlum [2,3Það hefur fyrst og fremst áhrif á liðbrjósk og undirbrjósk í liðvöðvum og veldur liðbilun, sem leiðir til verkja við þyngdarburð, þar á meðal við göngu og standandi stöðu [4].

Það er engin lækning við slitgigt, þar sem mjög erfitt er að endurheimta brjóskið þegar það hefur eyðilagst [5Markmið meðferðar eru að lina verki, viðhalda eða bæta hreyfigetu liða, auka styrk liðanna og lágmarka fötlunaráhrif sjúkdómsins. Lyfjameðferð við slitgigt miðar að því að draga úr verkjum til að auka liðstarfsemi og lífsgæði sjúklingsins. Þó að brjóskskemmdir séu aðalatburðurinn í slitgigt, er niðurbrot kollagens grundvallaratburðurinn sem ræður óafturkræfri framvindu slitgigtar í tengslum við bólgu [6,7Meðferðir með bólgueyðandi og brjóskverndandi virkni eru væntanlegar til að lina verki og viðhalda heilleika vefjagrindarinnar hjá sjúklingum með slitgigt.

Þess vegna mun minnkun bólgu líklega vera gagnleg við meðferð slitgigtar. Nýlegar rannsóknir benda til verndandi hlutverks náttúrulyfja á framgang slitgigtar, hvað varðar að draga úr bólgu í brjóskfrumum og frekari brjóskskemmdum, með getu þeirra til að hafa samskipti við liðtengda vefi, sem leiðir til minnkunar á liðverkjum [8].

RótSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) hefur verið mikið notað í hefðbundinni læknisfræði til meðferðar við höfuðverk, verkjum, bólgum og liðagigt í Kóreu og Kína.9,10]. Fjölbreytt lyfjafræðileg áhrifSaposhnikovia divaricata(SD) innihalda einnig bólgueyðandi, verkjastillandi, hitalækkandi og liðagigtarstillandi eiginleika [9,11Nýleg rannsókn sýndi fram á að SD krómónþykkni hefur hugsanleg áhrif á liðagigt í músamódeli af kollagenframkallaðri liðagigt [10]; Hins vegar hafa fáar rannsóknir verið gerðar til að styðja bólgueyðandi og liðagigtarhemjandi virkniSaposhnikovia divaricataútdráttur (SDE).

Þess vegna rannsakaði þessi rannsókn bólgueyðandi og slitgigtarhemjandi virkni 70% etanólútdráttar úr SD. Fyrst voru bólgueyðandi áhrif SDE metin.í tilraunaglasií LPS-framkölluðum RAW 264.7 frumum. Næst voru áhrif SDE á slitgigt mæld með því að meta þyngdarberandi dreifingu, niðurbrot liðbrjósks og bólgusvörun í rottumódeli af mónónatríumjoðóasetati (MIA-) framkölluðum slitgigt.